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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)主要步驟!
更新時(shí)間:2019-10-12   點(diǎn)擊次數(shù):1869次

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)主要步驟!


南京信帆生物技術(shù)有限公司提供實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù),包括放免實(shí)驗(yàn)代做,免疫組化,PCR,WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)等到,的設(shè)備加上技術(shù)嫻熟的實(shí)驗(yàn)操作人員,讓您的每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果均真實(shí)可靠,咨詢(xún)!PCR技術(shù)服務(wù),Q-,RT-PCR實(shí)驗(yàn)代做。


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PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè),熒光定量PCR代測(cè)服實(shí)驗(yàn)室試劑的操作:


1)所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。

2)所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過(guò)濾的,并且是高壓滅菌。

3)在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類(lèi)的抗微生物劑,在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。

4)所用試劑都應(yīng)該以大體積配制,實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。

5)所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。

6)新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。

7)樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。

Real -Time PCR,即實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物并進(jìn)行解析的方法,它是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì),并通過(guò)Real -Time PCR檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)程中的熒光信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),zui終對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理的方法。Real -Time PCR自1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出以來(lái),廣泛應(yīng)用于生物研究的各個(gè)領(lǐng)域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探針?lè)▋煞N。

 


PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè),熒光定量PCR代測(cè)服主要儀器及耗材:


旋渦振蕩器 :上海青浦瀘西儀器廠產(chǎn)品

手握式電動(dòng)勻漿機(jī):德國(guó)FLUKO 公司產(chǎn)品

低溫冷凍離心機(jī):Sigma(3K15)公司產(chǎn)品

Real-time檢測(cè)儀:ABI (ABI-7300)公司產(chǎn)品

超純水分離系統(tǒng):美國(guó)LABCONCO公司

離心管及10μL、200μL、1000μL槍頭等常規(guī)耗材均為國(guó)產(chǎn);RNA提取過(guò)程中所需的離心管、槍頭等耗材經(jīng)過(guò)0.1%的DEPC水浸泡過(guò)夜,121℃滅菌30min,烘干后備用。

 

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)主要步驟!

 

 

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