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人促甲狀腺激素FSH放免試劑盒簡(jiǎn)直太棒了!
更新時(shí)間:2018-08-31   點(diǎn)擊次數(shù):1184次

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實(shí)驗(yàn)原理
促甲狀腺激素(TSH)是含 211 個(gè)氨基酸的糖蛋白類激素,分子量約為 28,000D,由α 和β兩個(gè)亞基組成。TSH 主要受下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素(TRH)和血液中游離 的甲狀腺激素(T3、T4)的調(diào)節(jié)。TRH 可促進(jìn) TSH 的分泌,T3、T4對(duì) TSH 的分泌起負(fù)反饋 調(diào)節(jié)作用。另外,下丘腦分泌的(SS)和腎上腺皮質(zhì)分泌的糖皮質(zhì) 激素可降低 TSH 的分泌,而雌激素可增加其分泌。 本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含促甲狀腺激素(TSH)的樣 品和 125I 標(biāo)記的促甲狀腺激素(TSH)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二 抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中促甲 狀腺激素(TSH)的濃度。

 


樣本要求:
110 微升人血清樣本。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中,靜置使其凝固后,1500 轉(zhuǎn)/分離心,取其上清液,放置玻 璃瓶中。如果樣本不立即使用,可在-18℃~-25℃儲(chǔ)存 6 個(gè)月。 嚴(yán)重溶血、高濃度的脂類、膽紅素對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。

操作方法:
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作; 2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù); 3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 200µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中; 4、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 200µl 抗體工作液,充分混勻; 5、 37℃溫育 1.5 小時(shí); 6、 每管均各加入 200µl 標(biāo)記物工作液,充分混勻; 7、 37℃溫育 1 小時(shí); 8、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻; 9、 離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液; 10、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù); 11、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。


實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意:
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意] 1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%; 2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí),應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染; 3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于gao濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1: 4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試,測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

 

 

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